一般而言,常規的透析需要進行2天的時間,才能達到透析的目的。而擴散係數(diffusion coefficients)、pH、溫度、時間、物質濃度、溶液體積、緩衝液體積,緩衝液更換次數、透析膜表面積、透析膜厚度,攪拌等因素都會影響到透析的效率。
MWCO是甚麼?
Molecular Weight Cut Off(MWCO)載留分子量是評估透析膜孔洞大小的單位。MWCO被定義為經過17小時透析後,保留90%以上的分子量大小。
選擇透析膜MWCO大小=欲保留分子量大小÷3。
例如欲保留50KD以上物質,可選擇MWCO 20KD的透析膜。
如何進行透析: 將待透析品放入透析膜後,置入100X體積之緩衝液後開始進行透析。透析中至少進行三次緩衝液的換置,操作時間至少為16-24小時:
- 第一次:透析進行2-3小時後。
- 第一次:透析進行4-5小時後。
- 最後一次:overnight之前。
透析膜需要前處理嗎?
- Biotech RC、CE、與PVDF透析膜使用DI水清洗15-30分鐘(移除保存液sodium azide殘留)。
- Spectra/Por® 7 Standard RC透析膜已經過重金屬與硫化物去除的處理,只需要浸泡在DI水中15-30分鐘即可(移除保存液sodium azide殘留)。
- Spectra/Por 1-6 Standard RC透析膜,針對不同需求會有額外的處理手續。一般而言,可使用水清潔移除Spectra/Por 1-6 Standard RC透析膜中甘油的殘留。