2011年4月19日 星期二

研究Apoptosis-測定ADP/ATP比例的改變,可以區別細胞死亡或存活比例。BIOVISION代理-太鼎生物科技有限公司。

產品特點:
    同時偵測細胞凋亡(apoptosis)細胞壞死(necosis) 細胞休止(cell arrest)
細胞增殖(cell proliferation)
    靈敏度高 100 c ells/well
    操作簡單 快速且具高效率
         
用途:   測定ADP/ATP比例的改變,來區別細胞死亡或存活
        例如: proliferating cells:  ATP增加 /ADP減少
                 Apoptotic cell:  ATP減少/ADP增加
                   Necrosis cell:  ATP顯著減少/ADP顯著增加


Cell Fate
ADP Level
ATP Level
ADP/ATP

Proliferation
Very Low
High
Very Low

Growth Arrest
Low
Slightly Increased
Low


Apoptosis
High
Low
High

Necrosis
Much Higher
Very Low
Much Higher



實驗方法:

(一)    將懸浮細胞取10ul (103~104)至白盤並加入100 μl Nucleotide Releasing Buffer
    或貼附型細胞suction培養液後,103~104加入100 μl Nucleotide Releasing Buffer,於室溫輕
    輕反轉混合5
(二)    加入1ul ATP Monitoring Enzyme至上述已準備好的cell lysate, 1分鐘後以冷光儀測量細胞中ATP(data A)
(三)    同樣的sample 10分鐘後測量細胞中ADP(data B)
(四)    再加入1 μl ADP Converting Enzyme.1分鐘後再測量一次(data C)
計算ADP/ATPratio= Data C Data B /Data A


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